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標本成像-傳統光片顯微鏡的成像方式是怎么樣的?
光片顯微鏡對一個大的樣品組織進行三維成像時需要將樣本細分成多個ROI成像。這種方式本質上是光片顯微鏡中空間分辨率和視場大小之間的折衷。
在較大的FOV下,采用一個較長的光片激發成像,該方式成像的特點在于它的成像速度快,采集圖像的數據量小,且整個樣品被劃分的ROI較少,圖像三維重構相對容易。然而,由于此時用的放大倍數較小,視野大的同時,光片也較厚,因此光片的層析能力也大幅度降低,成像結果不但在橫向上的分辨率較低,其軸向上的分辨率也更低。
這時,研究者若想獲取更高空間分辨率的3D成像數據,就需要使用更大的放大倍數并且采用更薄的光片。那么,成像的FOV縮小,樣本成像細分的ROI將增多,導致樣品在橫向上的平移次數增加,此時采用的光片更薄,使得軸向上步進減小,樣品成像的速度變慢。樣品成像時間及采集數據大小會隨著空間分辨率的增高而增加。